护理学科学研究中心寄生虫实验安全操作规范
一、总则
1.目的：为确保实验室人员安全，防止交叉污染和环境泄漏，特制定本规范。
2.范围：本规范适用于人体寄生虫标本（涵盖血液、粪便、组织、体液等）接收、处理、检测、鉴定及保存的全过程。
3.核心原则：所有标本均应视为潜在传染源，严格执行“普遍防护”原则。
二、 人员管理与职责
1.准入制度：仅经系统培训（涵盖生物安全、操作技能及应急预案）且考核合格的人员，方可进入实验室开展工作。
2.健康管理：
·怀孕、存在免疫缺陷或患有其他基础疾病的人员，应开展风险评估，必要时暂缓实验操作。
3.个人责任：
·熟悉并遵守所有安全规定。
·及时报告任何意外事件、设备故障或潜在危害。
三、个人防护装备PPE
1.防护服：应穿着实验室专用白大褂或连体防护服，禁止将其穿入清洁区。
2.手套：佩戴一次性乳胶或丁腈手套。在操作不同标本、接触污染表面或离开实验室前，必须更换手套。严禁戴手套触摸门把手、电话、电脑等公共设施。
3.在进行可能产生气溶胶或喷溅的操作（如离心、涂片、镜检油镜）时，必须佩戴符合医疗级别的口罩，例如医用外科口罩或N95口罩，并配合使用护目镜或面罩以提供额外的防护。
4.鞋套：在必要时穿着。
四、实验室分区与行为规范
1.分区管理：
·清洁区：严禁携带任何实验材料进入。
·半污染区（缓冲区）：更衣室、试剂准备区。用于穿戴PPE和准备清洁物品。
·污染区（核心工作区）：标本处理区、染色区、镜检区。所有实验操作均在此区域进行。
2.行为规范：
·禁止行为：严禁在实验室内饮食、存放食物、擦拭口鼻。
·手部卫生：脱去手套后、离开实验室前，务必用肥皂和流动水或含酒精的快速手消毒剂彻底洗手。
·在实验室管理中，锐器的处理尤为重要。所有废弃锐器必须立即放入防刺穿的专用锐器盒中，盛装量不超过3/4。严禁回套针帽、折弯、折断或直接丢弃在普通垃圾桶中，以确保实验室的安全与秩序。
五、标本接收与处理
1.接收：核对标本信息，检查容器是否完好、无泄漏。对不合格标本应记录并通知送检部门。
2.前处理步骤：
·血液标本：离心应在有盖的离心机中进行，离心后静置数分钟再打开。
·组织及其他体液标本：均视为高风险标本，所有操作必须在生物安全柜内进行。
六、实验操作特定规范
1.涂片与染色：
·制作血涂片或粪涂片时，避免产生飞溅。
·使用吉姆萨、瑞氏等染液时，注意其易燃性和潜在致癌性，在通风良好的地方操作。
·染色后的玻片应用流水轻轻冲洗，避免形成气溶胶。
2.显微镜检查：
·在使用显微镜前后，应使用75%酒精对载物台及所有可能接触标本的部位进行擦拭，以确保消毒效果，因为这一浓度的酒精已被证实具有最佳的杀菌效果。
·使用油镜后，应及时用镜头纸蘸取二甲苯或其替代品来清洁油镜镜头。同时，需注意二甲苯具有毒性，应避免吸入和皮肤接触。
·镜检发现的阳性涂片应做好标记，并按规定进行消毒处理或妥善保存。
3.病原体培养与动物实验：
·利什曼原虫、弓形虫等病原体的培养必须在相应级别的生物安全柜（通常为BSL-2）中进行。
·涉及感染性动物的操作需在动物生物安全实验室中进行，并遵守相关动物伦理与福利规定。
七、 消毒与废弃物处理
1.日常消毒：
·工作台面：每天实验前后用有效氯含量为0.5%—1.0%的含氯消毒液或75%酒精擦拭。
·设备表面：离心机、生物安全柜、显微镜等需定期使用消毒剂进行清洁。
2.标本和培养物废弃物：
·所有剩余的标本、培养基、离心管等应高压蒸汽灭菌（121℃，≥30min）后再作为医疗废物处理。
3.玻璃器皿与锐器：
·可重复使用的玻璃器皿需先浸泡在消毒液中过夜，随后进行高压灭菌处理，最后进行清洗。
·一次性锐器直接放入锐器盒，连同其他感染性废物一起交由有资质的医疗废物处理公司处置。
4.溢出处理：
·应立即使用吸附材料（如纸巾）覆盖溢出物。
·从外围向中心小心倾倒含氯消毒液（有效氯约1%），作用30—60分钟。
·应使用镊子或佩戴双层手套清理破碎物品和污染物，并将其全部放入医疗废物袋。
·需使用消毒剂再次对污染区域进行擦拭。
八、 应急处理
1.皮肤接触：应立即使用大量肥皂水和流动水冲洗至少15分钟。
2.眼睛溅入：应立即使用洗眼器或生理盐水进行冲洗，时长至少15分钟。
3.针刺或切割伤：轻轻从近心端向远心端挤压伤口，尽可能挤出血液，用肥皂水和流水冲洗，然后用75%酒精或0.5%碘伏消毒包扎。立即报告中心负责人，进行风险评估、医学观察和记录。
4.衣物污染：立即脱去被污染的衣物，用消毒剂浸泡，并对暴露皮肤进行清洗消毒。
5.所有意外事件均需填写《意外事件报告表》，并存档。
